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技术原理:

Genloci的蛋白表达专家在 CHO-K1 基础上开发出短周期高表达株系 CHO-SC 为表达载体的真核表达系统,利用吉锐生物专利的 MCI 技术,将目的基因的多个拷贝定点整合到基因组高表达位点,同时实现稳定遗传。高效的转染和整合技术,加上特有的短周期高表达株系,可以低成本,独特的以哺乳动物细胞为表达载体的真核表达系统,高效的转染技术,可以低成本,短周期为您提供毫克级的表达蛋白,解决传统的表达系统所面临的多种缺陷,帮助您快速获得满意的实验结果。

实验流程:

1. 亚克隆:将客户优化好的目的基因(Genloci也可以提供基因优化服务)克隆到吉锐生物定点整合载体上;
2. 转染:采用独家的CHO-MCI(多拷贝整合)技术,将定点整合载体电转到CHO-SC细胞中;
3. 稳转池验证:100ml摇瓶小试表达目的抗体和纯化。将细胞表达上清通过Protein A柱纯化后,跑SDS-PAGE,同时通过上牛血清白蛋白(BSA)作为控制带进行定量和纯度分析。
4.扩大培养:根据100ml的小试定量结果,估算获得客户要求数量的蛋白所需要扩大培养的体积,拿到足够量的蛋白。


 
表达EGFP蛋白Pool细胞培养上清亲和
纯化后SDS-PAGE检测,条带单一明显。

纯化后的目的蛋白(EGFP)肉眼观察可见明显绿色荧光,蛋白活性佳。
 

技术优势

更接近天然结构,活性更高;

表达产物有正确的修饰,比如糖基化,甲基化等;

解决真核生物表达,成本高昂的问题;

生产周期短,可以快速达到 μg,mg 级别,用于抗原抗体的制